Controle da antracnose da oliveira através de silenciamento e expressão de genes utilizando um vírus de planta como vector

Colletotrichum spp. é o agente causal da antracnose da oliveira, doença que causa graves prejuízos em Portugal, assim como em outros países mediterrânicos. Tipicamente causa necroses em frutos, danificando-os, levando à sua queda prematura e má qualidade do azeite. A cultivar 'Galega vulgar', muito típica em Portugal, é muito suscetível à antracnose, no entanto, em condições ambientais favoráveis a doença também pode afetar gravemente outras variedades menos suscetíveis como 'Arbequina' e 'Picual', amplamente cultivadas na Península Ibérica. 

O objetivo deste trabalho é desenvolver uma medida de controle contra o fungo Colletotrichum spp. através do RNA de interferência (RNAi). O RNAi é um mecanismo que leva ao silenciamento de genes pós-transcrição (PTGS) e ocorre quando moléculas de RNA de cadeia dupla (dsRNA) são reconhecidas por um organismo como estranhas, desencadeando nesse organismo um processo de defesa no qual o dsRNA é degradado e usado como molde de forma a que RNAs homólogos sejam destruídos, impedindo a sua posterior expressão. Neste trabalho, uma sequência de dsRNA de um gene essencial para a sobrevivência de Colletotrichum spp. irá ser introduzida no interior deste fungo para que ocorra silenciamento. Tal será feito com o recurso a vírus como vetores de sequências de RNA para silenciamento (VIGS). O VIGS será inoculado em plantas e pretende-se que o fungo adquira este vetor e/ou o dsRNA, aquando da sua alimentação dentro da planta; desta forma o RNAi será desencadeado e a expressão do gene deste fungo será impedida e o fungo não conseguirá sobreviver. 

Os clones virais OMMV, OLV 1 e TNV-D serão utilizados para verificar a sua capacidade de infetar o fungo Colletotrichum spp. Estes três vírus têm características que os colocam como ferramentas muito promissoras para serem utilizados como vetores. Por terem pequenos genomas tornam-se fáceis de manipular, além disso, são assintomáticos ou causam apenas sintomas sistémicos leves em uma ampla gama de culturas, o que facilitará sua manipulação em construções assintomáticas e permitirão sua aplicação a um grande número de plantas. O vetor criado neste trabalho atuará como um VIGS, capaz de se replicar em plantas e dentro de fungos, e transportar sequências de RNA específicas, o que desencadeará o silenciamento de RNAi em Colletotrichum spp., e contribuir para o controlo eficiente deste fungo. Este plano de trabalhos tem um interesse significativo devido ao seu potencial inovador, sendo a primeira vez que será usada uma ferramenta de silenciamento em proteção de plantas. Para além disso, irá fazer face à necessidade urgente de combater este devastador fungo que é uma crescente preocupação dos produtores e para o qual apenas existem tratamentos com fungicidas sintéticos inespecíficos que se têm mostrado ineficientes, dispendiosos e prejudiciais para o ambiente.